赤红球菌组氨酸激酶的融合表达和功能分析

对赤红球菌的组氨酸激酶基因进行密码子优化，将优化后的组氨酸激酶基因（rhks）构建重组表达质粒pGEX-4T-2-rhks。将此质粒导入到大肠杆菌BL21（DE3）中进行异源表达。在25 ℃和1 mmol/L异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导条件下，组氨酸激酶融合蛋白（GST-RHK）获得成功表达，并具有催化活性。经谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化，获得电泳纯的GST-RHK，其中纯化倍数为3.1，得率为19.5%。该蛋白大小约为72.75 kDa，Km、Vmax和Kcat值分别为20.92 μmol/L、0.17 μmol/（L·min）和1.4 min－1。野生型赤红球菌、组氨酸激酶基因增强株sdrhkE和组氨酸激酶基因敲减株sdrhkD在分别含有苯酚、甲苯、氯苯、异辛烷4 种有机溶剂的培养基中培养，菌株sdrhkD的生长情况都优于野生型赤红球菌，菌株sdrhkE的生长情况都低于野生型赤红球菌。本研究为进一步揭示赤红球菌SD3中组氨酸激酶涉及的信号转导途径与赤红球菌有机溶剂耐受性的关联机制提供一定参考依据。     

苯乳酸抑制链格孢霉作用靶位的分析

以从自然腐败的樱桃上分离的链格孢霉（Alternaria sp.）LD3.0086为指示菌，研究苯乳酸对链格孢霉的主要抑制作用靶位。应用分光光度法测定苯乳酸对链格孢霉的最小抑菌浓度，通过卡尔科弗卢尔荧光增白剂染液（calcofluor white，CFW）染色观察苯乳酸对菌丝顶端生长的破坏作用，利用扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察链格孢霉的超微结构变化，通过测定苯乳酸作用前后链格孢霉上清液中N-乙酰葡萄糖胺质量浓度变化研究苯乳酸对菌丝细胞壁的破坏作用，应用荧光双染色法观察苯乳酸对链格孢霉菌丝细胞膜的损伤作用。结果表明，12.5 mmol/L的苯乳酸能有效抑制链格孢霉的生长；与对照组（无菌水处理）相比，苯乳酸处理后链格孢霉顶端生长细胞无明显形变，经12.5 mmol/L苯乳酸处理的链格孢霉上清液中N-乙酰葡萄糖胺质量浓度基本不变；苯乳酸处理24 h，链格孢霉菌丝细胞壁表面无明显损伤，细胞内结构发生明显变化；苯乳酸短时间（4 h）处理链格孢霉，菌丝细胞膜仍较为完整，加入苯乳酸较长时间（8 h）后细胞膜发生破裂。综合分析可知，苯乳酸对链格孢霉的主要作用靶位应不是菌丝体的细胞壁和细胞膜，而是在菌丝体内部，通过破坏菌丝内部细胞器结构或引起细胞内的生化反应，从而抑制链格孢霉的生长和繁殖，发挥抑菌活性。     

Realizing fragment spawning and fragment growth in the parallelized Discrete Element Method (DEM) during modelling of comminution

The particle based Discrete Element Method (DEM) can be applied to examine comminution processes. In this study, a DEM framework has been extended to model particle breakage without mass loss. After a breakage event occurs, spherical particles, as often considered in the DEM, are replaced by size reduced spherical fragments. During the following time steps, the fragments grow to their desired sizes, so that the mass loss can be counterbalanced. Previously defined overlaps with adjacent unbroken and broken particles (fragments) as well as walls are allowed. The breakage model has been realized in a parallelized DEM framework because comminution processes are often attributed to large numbers of particles and by parallelization the computational time can be reduced efficiently. An oedometer (one-dimensional compression in axial direction of a confined particle bed) has been modelled to investigate the parallelization efficiency and the influence of the permitted overlaps during the growth process on the growth duration. A simplified roller mill has been considered to examine the applicability of the breakage procedure considering parallelization. The results show that parallelization reduces computational time considerably. The breakage procedure is suitable to model comminution processes involving even densely packed particle systems and is superior to existing approaches.     

牛磺酸对运动能力影响的研究进展

牛磺酸是一种含硫条件性必需氨基酸,是人和动物机体内不可缺少的一种生理活性物质。牛磺酸对于机体的运动能力有着重要的影响,本文在介绍牛磺酸的代谢过程及生理作用的基础上,对目前国内外关于补充牛磺酸与提高人体的运动能力的关系、牛磺酸的安全性及副作用等方面研究情况做一综述。牛磺酸已开发成颇具潜力的抗运动性疲劳的营养补充剂,同时在医药、卫生、保健等领域里也具有广泛商业价值和社会价值。     

基于蛋白质组学技术研究秦川牛肉宰后贮藏过程中肌红蛋白含量及其衍生物转化

本实验采用4D-非标记蛋白质组学技术研究秦川牛肉贮藏过程中（0～8 d）肌红蛋白含量及其衍生物的转化情况，阐释冷却秦川牛肉中肌红蛋白含量及其衍生物转化的分子机制。结果表明：贮藏过程中，肌红蛋白表达量在宰后0～4 d上升、4～8 d下降，利用非标记蛋白质组学技术鉴定出与肌红蛋白及其衍生物相关的差异蛋白14 种，具体包括代谢酶、氧化还原酶、过氧化物酶、伴侣蛋白4 类，这4 类蛋白的表达共同调控贮藏过程中肌红蛋白含量的变化及其3 种衍生物之间的转化，具体表现为贮藏过程中肌红蛋白表达量整体呈下降趋势，氧合肌红蛋白相对含量持续下降，脱氧肌红蛋白、高铁肌红蛋白相对含量逐渐增加，导致肉色发生褐变。本研究结果有利于理解秦川牛肉贮藏过程肉类变色的复杂生化变化机制。     

基于柠檬酸-铕纳米配位聚合物构建荧光探针快速检测汤煲中5’-肌苷酸含量

基于柠檬酸-铕金属有机纳米配体聚合物（citrate/europium lanthanide coordination polymer nanoparticles，Cit/Eu LCP NPs）构建快速检测肉品汤煲中5’-肌苷酸（inosine-5’-monophosphate，5’-IMP）的荧光探针。研究结果表明，5’-IMP对Cit/Eu?LCP?NPs有良好的荧光猝灭作用。在最佳条件下，该荧光探针在5’-IMP?2.5～200?μg/mL的质量浓度范围内呈现出良好的线性关系，检出限为0.17?μg/mL，且具备良好的抗干扰、稳定性和重复性。为了验证方法可行性，将该方法应用于实际鸡汤样品中的5’-IMP检测，测得加标回收率为97.85%～103.95%，可为快速检测肉品汤煲中5’-IMP提供新的思路和方法。     

一种5 重real-time PCR筛查转基因水稻方法的建立

以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象，利用5 种不同的荧光信号（FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5）进行多重实时聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction，real-time PCR）检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验，建立了5 重real-time PCR方法，灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确、通量大等优点，可实现水稻中转基因成分的快速、高效检测。     

哈尔滨典型街谷空间PM2.5分布场与绿色界面指数相关性 研究

在城市化快速进程的背景下，城市 街区PM2.5污染日益严重，本文选取哈尔滨 在不同季节的典型街谷空间，对以叶面积密 度（LA D）、叶面积指数（LAI）为实测要素 的绿色界面指数以及PM2.5浓度进行实测对 比研究。通过对实测数据的分析和挖掘，最 终得出如下结论：首先，典型街谷空间PM2.5 时段浓度呈现上午比下午平均高37.75%，冬 季比夏季高4.7倍的特征；其次，街谷空间的 灌木界面对PM2.5浓度场平均积极贡献率为 18.62%；最后，对PM2.5的衰减率与实测街 谷绿色界面的叶面积密度（LAD）与叶面积 指数（LAI）进行相关性分析，结果显示街谷 绿色界面对PM2.5浓度的衰减作用与叶面积 密度（LAD）呈显著负相关关系，与叶面积指 数（LAI）的相关性程度较弱。